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德國(guó)Zellwerk三維細(xì)胞及組織培養(yǎng)系統(tǒng)
ZRP 平板灌流式反應(yīng)器主要原理：
ZRP生物反應(yīng)器易于組裝和使用。目前ZRP生物反應(yīng)器有兩種不同的培養(yǎng)模式。*種是平板灌流式反應(yīng)器，適用于干細(xì)胞和NK細(xì)胞的培養(yǎng)(如下圖)。
由于干/祖細(xì)胞和NK細(xì)胞對(duì)剪切力相當(dāng)敏感，可能會(huì)受到懸浮攪拌培養(yǎng)系統(tǒng)中流體剪切力的損傷，而且攪動(dòng)可能會(huì)影響包括細(xì)胞因子受體在內(nèi)的表面標(biāo)志的表達(dá)，在一定程度上會(huì)影響干/祖細(xì)胞和NK細(xì)胞的增殖與分化。同時(shí)攪拌會(huì)使細(xì)胞處于相對(duì)分散的狀態(tài)，不利于細(xì)胞之間的相互作用。所以低剪切力、低局部濃度梯度以及適度的細(xì)胞間通訊是干/祖細(xì)胞和NK細(xì)胞體外擴(kuò)增所需要的。ZRP生物反應(yīng)器底部?jī)?nèi)表面設(shè)有多個(gè)肋條，用于截留細(xì)胞，使細(xì)胞聚集在一定的空間范圍內(nèi)，加強(qiáng)了細(xì)胞間的通訊，并可以克服動(dòng)態(tài)攪拌式反應(yīng)器細(xì)胞分散及難以相互作用的缺點(diǎn)。該生物反應(yīng)器中的培養(yǎng)液采用循環(huán)培養(yǎng)方式，通過(guò)控制系統(tǒng)可精準(zhǔn)控制培養(yǎng)體系的酸堿度和氧含量，以此來(lái)改善傳質(zhì)限制，維持主體培養(yǎng)基相對(duì)均一性，同時(shí)克服靜態(tài)培養(yǎng)存在局部濃度梯度的缺點(diǎn)。細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有攪動(dòng)，消除了動(dòng)態(tài)攪拌式反應(yīng)器中剪切力可能對(duì)造血干/祖細(xì)胞和NK細(xì)胞造成的機(jī)械損傷。培養(yǎng)過(guò)程可以實(shí)行無(wú)菌取樣操作，用于細(xì)胞計(jì)數(shù)和觀察細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)等。
ZRP 平板灌流式培養(yǎng)器主要應(yīng)用領(lǐng)域：
快速大量擴(kuò)增干細(xì)胞和T細(xì)胞
快速大量擴(kuò)增免疫系統(tǒng)細(xì)胞如NK細(xì)胞
擴(kuò)增并獲得可用于治療的高活性免疫細(xì)胞
ZRP平板灌流式反應(yīng)器的優(yōu)勢(shì)：
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器底面的肋條起到截流細(xì)胞的作用，從而使細(xì)胞較好地聚集在一個(gè)有限的空間范圍內(nèi)，加強(qiáng)了細(xì)胞間的通訊，更好地發(fā)揮細(xì)胞間的相互作用，克服了動(dòng)態(tài)攪拌式生物反應(yīng)器的缺點(diǎn)。
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器能有效地截留細(xì)胞，且細(xì)胞在生物反應(yīng)器中的分布較均一，并沒(méi)有堆積在液體流動(dòng)方向上的肋條的一側(cè)，而是積累在兩條肋條間的凹槽中，這主要是因?yàn)榧?xì)胞是通過(guò)靜態(tài)接種的方式接種于平板灌流式反應(yīng)器中，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的靜置后，細(xì)胞在重力作用下沉入生物反應(yīng)器兩肋條之間的凹槽中，且循環(huán)培養(yǎng)基流速較低，細(xì)胞在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中能較均一地分布于生物反應(yīng)器中。
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器具備無(wú)菌且溫度可控的培養(yǎng)工作室，細(xì)胞樣品的制備、接種、介質(zhì)容器的更換，管件的更換，傳感器的更換，細(xì)胞收集等都可在無(wú)菌且嚴(yán)密可控的環(huán)境下進(jìn)行。
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器具備高精準(zhǔn)控制單元，系統(tǒng)過(guò)程參數(shù)通過(guò)集成式的觸摸屏獲得。所有相關(guān)的培養(yǎng)數(shù)據(jù)可被有效記錄，并經(jīng)遵循 GMP 標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行軟件在個(gè)人電腦上進(jìn)行評(píng)估。
ZRP平板灌流式培養(yǎng)器(培養(yǎng)容積500ml)
ZRP平板灌流式培養(yǎng)器(培養(yǎng)容積50ml)
ZRP 旋轉(zhuǎn)載體灌流式反應(yīng)器主要原理：
第二種是旋轉(zhuǎn)載體灌流式反應(yīng)器，適用于貼壁細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)，主要用于生產(chǎn)蛋白和細(xì)胞因子。該反應(yīng)器應(yīng)用Sponceram圓盤(pán)(一種特殊的多孔陶瓷)作為載體，具有*的比表面積，可以提供上萬(wàn)平方米的培養(yǎng)面積，可以極大地提高貼壁細(xì)胞的細(xì)胞密度和細(xì)胞產(chǎn)物的產(chǎn)量。同時(shí)反應(yīng)器有一個(gè)磁耦合旋轉(zhuǎn)軸，溫和的載體旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)避免了外來(lái)剪切力對(duì)自細(xì)胞的影響，從而促進(jìn)細(xì)胞及組織的粘附和快速增殖。該生物反應(yīng)器中的培養(yǎng)液采用循環(huán)培養(yǎng)方式，通過(guò)控制系統(tǒng)可精準(zhǔn)控制培養(yǎng)體系的酸堿度和氧含量，以此來(lái)改善傳質(zhì)限制，維持主體培養(yǎng)基相對(duì)均一性，同時(shí)克服靜態(tài)培養(yǎng)存在局部濃度梯度的缺點(diǎn)。在收集細(xì)胞的過(guò)程中，采用特殊的旋轉(zhuǎn)程序結(jié)合分離溶液，使得貼壁細(xì)胞的收集獲得非常方便。
ZRP 旋轉(zhuǎn)載體灌流式培養(yǎng)器主要應(yīng)用領(lǐng)域：
進(jìn)行三維貼壁細(xì)胞高密度培養(yǎng)
快速大量擴(kuò)增貼壁細(xì)胞如貼壁型間充質(zhì)干細(xì)胞
快速大量擴(kuò)增長(zhǎng)期分泌型貼壁細(xì)胞
高效生產(chǎn)重組蛋白、糖蛋白和多肽等
ZRP旋轉(zhuǎn)載體灌流式培養(yǎng)器
ZRP旋轉(zhuǎn)載體灌流式培養(yǎng)器
ZRP旋轉(zhuǎn)載體灌流式反應(yīng)器的優(yōu)勢(shì)：
Ø 應(yīng)用Sponceram圓盤(pán)(一種特殊的多孔陶瓷)作為載體，具有*的比表面積，可以提供上萬(wàn)平方米的培養(yǎng)面積，可以極大地提高貼壁細(xì)胞的細(xì)胞密度和細(xì)胞產(chǎn)物的產(chǎn)量
Ø 溫和的載體旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)避免了外來(lái)剪切力對(duì)自細(xì)胞的影響，從而促進(jìn)細(xì)胞及組織的粘附和快速增殖，特別適用于軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞和各種祖細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)。
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器具備無(wú)菌且溫度可控的培養(yǎng)工作室，細(xì)胞樣品的制備、接種、介質(zhì)容器的更換，管件的更換，傳感器的更換，細(xì)胞收集等都可在無(wú)菌且嚴(yán)密可控的環(huán)境下進(jìn)行。
Ø ZRP平板灌流式反應(yīng)器具備高精準(zhǔn)控制單元，系統(tǒng)過(guò)程參數(shù)通過(guò)集成式的觸摸屏獲得。所有相關(guān)的培養(yǎng)數(shù)據(jù)可被有效記錄，并經(jīng)遵循 GMP 標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行軟件在個(gè)人電腦上進(jìn)行評(píng)估。
應(yīng)用ZELLWERK系統(tǒng)進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC細(xì)胞)GMP級(jí)別大規(guī)模擴(kuò)增
(德國(guó)默克醫(yī)藥公司)
應(yīng)用ZELLWERK系統(tǒng)進(jìn)行外周血單核細(xì)胞(PBMCs)大規(guī)模培養(yǎng)后相關(guān)抗體檢測(cè)顯示培養(yǎng)的高效性(拜耳醫(yī)藥保健公司)
應(yīng)用ZELLWERK系統(tǒng)進(jìn)行NK細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)后，純度為98%-100%，活性大于80% ，高于目前市場(chǎng)上其他任何細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器
(德國(guó)柏林夏洛蒂醫(yī)科大學(xué)腫瘤與癌癥研究所，Charité Universitätsmedizin Berlin.)
